Bio-Rad的V3 Western流程是在传统的Western流程中引入了创新的免染(Stain-Free)技术。操作过程并没有什么变化,但能够大大缩短整个实验的时间。同时,免染技术让研究人员能看到凝胶和转印膜上的蛋白质,而无需染色,也不会影响免疫检测中的抗体杂交。
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Western blot实验的失败,那都是家常便饭。据Bio-Rad统计,大约一半的研究人员表示,他们Western blot的失败率至少在25%。如此高的失败率,难怪会让人心慌慌。况且整个实验流程那么长,辛苦一整天,得到一张“白板”,还真是有点不甘心。
其实,我们会如此焦虑,是因为实验过程中几乎没什么机会来检查结果是否和预期的一致。我们只能通过预染marker来了解大致情况。如果在Western blot流程中加入检查点,确保每一步都获得可靠的结果,那势必能减轻研究人员的焦虑。基于这一考虑,Bio-Rad推出了V3 Western Workflow。
这个V3流程是在传统的Western流程中引入了创新的免染(Stain-Free)技术。操作过程并没有什么变化,但能够大大缩短整个实验的时间。同时,免染技术让研究人员能看到凝胶和转印膜上的蛋白质,而无需染色,也不会影响免疫检测中的抗体杂交。
V3,这代表什么?据Bio-Rad介绍,V3即V+V+V,但这三个V有着不同的涵义。第一个V代表Visualize。在电泳结束后将凝胶放入Bio-Rad的成像系统中1分钟激活成像,即可得到一张类似于考马斯蓝染色的图像,从而判断分离效果。第二个V是Verify。在转印结束后,通过成像系统可以看到印迹膜上的蛋白,从而判断转印的效率。至于第三个V,就是Validate,利用膜上的总蛋白作为内参来进行定量归一化。
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