Sciencell培养基系列研究:不同培养基对骨髓间充质干细胞免疫学特性的影响
货号 7501
产地 美国
缩写 MSCM
规格 500ml
用途 科研
储存 4度,-20度
运输 胶冰
间充质干细胞培养基是专门为人类间充质干细胞体外培养所设计的、zui适合其生长的培养基。是经灭菌的液体培养基,包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质和低浓度胎牛血清(5%)。该培养基缓冲体系为重碳酸盐,在含5%CO2的细胞培养箱中平衡后pH值为7.4。该培养基的配方能够选择性的促进正常人类微血管内皮细胞体外培养中的增殖和生长,并为其达到zui理想营养平衡状态提供数量上和质量上的保证。
间充质干细胞培养基包含500 ml基础培养基,25ml胎牛血清(FBS,目录编号0025),5ml间充质干细胞生长添加物,(MSCGS,目录编号7552)和5 ml青霉素/链霉素溶液(P/S,目录编号0503)
骨髓来源的间充质干细胞(MSC-bm)具有获取方便、增殖能力强以及多向分化潜能等优点,是近年来再生医学和组织工程极具研究及利用价值的种子细胞。不仅如此,MSC-bm 的低免疫原性和免疫调节功能, 使其在抑制免疫排斥和治疗自身免疫性疾病方面同样具有广阔的应用前景。但MSC-bm仅占骨髓中单个核细胞的0.001%~0.01%,难以满足科研和临床应用的需要,所以需要在体外进行分离纯化并培养扩增。
sciencell 间充质干细胞培养基 MSCM 货号7501
常规的MSC-bm培养基是添加了10%FBS的低糖DMEM,可保证MSC-bm未分化增殖。但是,由于血清中含有许多未确定成分和各种生长因子,且不同批次血清成分不稳定、生长因子浓度不确定,不利于将来MSC-bm临床应用的标准化,而且常规培养基培养的MSC-bm 在体外易出现老化及增殖能力的下降。
商品化的ScienCell干细胞培养基降低了FBS的浓度,含有确定浓度的FGF-2、EGF、BSA、转铁蛋白、胰岛素和氢化可的松等,可显著提高MSC-bm的扩增效率,并能在一定程度上规范MSC-bm的培养条件,提高实验的可重复性。但培养基中各种添加成分是否改变MSC-bm的免疫学特性,目前并不明确。
中国医学科学院整形外科医院的傅歆、肖苒等比较了MSC-bm在ScienCell 干细胞培养基和低糖DMEM完全培养基培养下的免疫学特性。他们利用流式细胞分析MSC-bm表面标志物的表达;通过体外成骨和成脂诱导,鉴定MSC-bm的多向分化能力;应用混合淋巴细胞反应实验,比较ScienCell组和LG组MSC-bm的免疫原性及免疫调节功能。结果显示:两组培养基培养的MSC-bm均具有低免疫原性和免疫抑制功能,ScienCell组单向混合淋巴细胞增殖率显著高于LG组,而两组双向混合淋巴细胞增殖率未见显著差异。流式细胞仪分析显示ScienCell组MSC-bm中免疫共刺激因子CD40阳性的细胞比例高于LG组,而HLA-DR以及免疫共抑制因子B7-H1和B7-DC阳性细胞比例低于LG组。
IFN-γ 是免疫反应中主要由活化的天然杀伤细胞和T 细胞分泌的一种促炎因子,是MHC分子zui主要的诱导物,可通过诱导多种细胞表达MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ类分子,从而增强免疫应答。本研究显示在体外培养过程中,炎症因子IFN-γ的刺激会造成人MSC-bms中HLA-DR表达水平的上调。此外,低浓度IFN-γ 仅少许上调LG 组MSC-bm中CD40 的表达水平,其他分子在两组均保持稳定不变;但是,高浓度IFN-γ 刺激后,两组MSC-bm的免疫分子表达均上调且并无显著差异,提示在体内高浓度炎症因子微环境中,两组培养基培养下的MSC-bm 的免疫学特性可能会趋于一致。
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