我使用贵司的重组蛋白作为相应的R&D Systems® Luminex®多因子检测试剂盒的对照。为什么我看到数值有差异?

首先，需要大量稀释才能让重组蛋白置于标准曲线范围内。通常来说，这是从µg/mL到pg/mL的稀释。所有稀释步骤都会引入不准确性，稀释的幅度越大，产生错误的可能性就越大。任何移液错误或未校准的移液器都会导致明显的回收率过高或不足。其次，R&D Systems® Luminex®多因子检测的开发是为了测定被一种抗体捕获并被另一种抗体检测的蛋白质水平。这种检测采用最初开发试剂盒时建立的标准品进行校准。这些初始标准品的蛋白质测定成为配制新标准品的主校准品。这使得不同批次的R&D Systems® Luminex®免疫检测试制盒具有一致性。通常，在使用Luminex® Assay测定蛋白质浓度时，我们预计回收率为管上标明量的+/-30%。对于不同批次的蛋白质，免疫学上可识别的质量可能略有差异，因此在用于免疫检测时，不同批次产品管壁上规供的表面浓度也会有所不同。如果您使用蛋白质作为质控，在设定质控水平时最好根据免疫检测中的测量值来分配质量，而不使用管上标注的质量。

为什么必须使用聚丙烯管来进行标准曲线的稀释?

某些蛋白质或分析物会与玻璃或聚苯乙烯结合，但不容易与聚丙烯管结合。

我可以使用部分微孔板吗?

您无需一次性用完一整块微孔板上的全部孔，可以保留微球或生物素化检测抗体混合物浓缩液。但建议您检测时应制备新鲜的工作液，包括微球、生物素化检测抗体、标准品和质控品。冻干的标准品和质控品仅供一次性使用，非且需要在检测时新鲜制备。

我能否根据试剂盒说明书中的说明调整孵育时间或温度?

R&D Systems®已优化了检测的孵育时间和温度。每个试剂盒均已按照试剂盒说明书中的操作方案进行了验证。如果操作方案经过任何更改，我们将无法保证试剂盒的性能。

不同试剂盒中的试剂可互换吗?

检测稀释液、校准稀释液及其他试剂盒组分只有在货号和批号都相同的情况下才可以互换。R&D Systems®进行了"试剂盒整体质量控制"，这意味着我们不支持在检测中使用其他批次或来源的试剂来代替。

为什么样品重复之间存在很高的差异性?

较高的批内差异性可能是由移液技术和/或清洗技术不佳造成的。