奶制品有机酸、糖类分析的好帮手----Aminex HPX 分析柱

2024-01-26

Aminex HPX 是 Bio-Rad 研发生产的离子排阻色谱柱。在分析有机酸、单糖、寡糖、发酵过程控制方面具有无需要衍生、检测快速、分离目标产物多样等优势。在食品工业中,尤其是产品质量分析、品质控制以及新产品开发、生产过程监控等诸多方面有着广泛的应用。

乳制品中广泛存在着大量的糖类以及蛋白质脂类以外的活性物质,其中乳糖、葡萄糖、半乳糖等糖类物质也是乳品质量控制的主要指标之一。


奶制品中的乳糖检测

关于乳糖,由于乳糖不耐症广泛存在(>65%,Ingram、Mulcare、Itan、Thomas 和 Swallow,2009 年),目前,没有关于乳糖浓度的国际统一标准,低于该浓度的乳制品被定义为无乳糖。在一些欧洲国家,无乳糖阈值为 <0.1% (w/w),中国的规定为<0.5% (w/w) 的乳糖允许标记为无乳糖。此外,一些乳制品中使用了“低乳糖”和“低乳糖”等术语,其中“低乳糖”在一些欧洲国家意味着 <1% (w/w),“低乳糖”意味着乳糖浓度必须低于 2.0% (w/w) ( EFSA, 2010 )。显然,准确而可靠地定量乳制品中的残留乳糖对于乳制品行业至关重要,既可以提供高质量的产品,也可以满足当地的要求。

Aminex HPX-87C 是一种简单、快速的高效液相色谱 (HPLC) 方法来同时测定低乳糖牛奶中的乳糖、葡萄糖和半乳糖。糖在 Bio-Rad HPX-87C 固定离子树脂柱上以 Ca 2+形式分离,使用水作为流动相,流速为 0.6 毫升/分钟。将柱加热至 80°C,并使用折光率检测糖。分析了低乳糖牛奶的乳糖及其水解产物。通过用乙腈沉淀蛋白质和脂肪,快速制备用于注射的牛奶样品。乳糖、葡萄糖和半乳糖的保留时间分别为 9.3、10.8 和 12.3 分钟。

Aminex HPX-87 C 柱温 80℃,Micor-guard保护柱,流动相:水,流速 0.6ml/min.上样量2.5ul。

峰:1)蔗糖 2)乳糖 3)葡萄糖 4)半乳糖(M.L. Richmond,B.R. Harte,J.I. Gray,C.M. Stine,1987)

酸奶的发酵以及品控

在酸奶发酵过程中,乳酸菌将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖,并产生有机酸。此外,发酵乳中的有机酸也来源于动物在产奶过程中的新陈代谢,以及加工和贮藏过程中乳脂的水解。这些化合物是酸奶中细菌活性的重要指标,有助于形成此类产品的特色味道和风味。碳水化合物和有机酸含量(例如 pH 值和酸度)可用于监测发酵剂和益生菌的发酵过程[2]。因此,具有检测酸奶发酵过程的有机酸和碳水化合物有重要的意义。

Aminex HPX-87H 流动相使用 5% 的稀硫酸,除进行有机酸分析外,同时也可以对单糖进行分析。

图2 碳水化合物(A1、B1 )和有机酸(A2、B2)的典型色谱图:(A) 浓度为 0.05 mg mL −1 的单个化合物的标准混合物;(B)天然羊奶酸奶;色谱峰上的数字表示乳糖 (1)、葡萄糖 (2)、半乳糖(3)、柠檬酸(4)、乳酸 (5) 和甲酸(6)( Marion Pereira da Costa,Beatriz da Silva Frasao,Bruno Reis Carneiro da Costa Lima,Bruna Leal Rodrigues,Carlos Adam Conte Junior,2016)

总结

乳制品中的有机酸和碳水化合物存在着多种方式的检测,但是在准确性和效率综合上来看,HPLC-Aminex 法有着非常优秀的时效性和准确性,是一款简单方便的精确检测方法。此外,可以同时可以进行其他的碳水化合物以及有机酸的分析,无需样品衍生,操作简单等特点,这使 Aminex 成为了乳制品质控和分析的好帮手! 


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