PromoCell的人类心肌细胞的来源

PromoCell的人类心肌细胞（HCM）分离自成人心脏的心室，该组织来源于正在进行心脏移植的患者的外植心脏。

a）当一个大样本的心肌进行了灌注和不完全消化时，会分离得到的杆状的心肌 细胞。其中一些细胞会自发进行常规的收缩，而其它一些只有受到刺激时才会收缩。由于其收缩功能，它们通常能用于生理研究。然而，有规律的肌节排布，会阻止大多数的细胞附着到TC培养皿上，因此，它们在体外是无法生长的。

b）而另外一种情况下，当成人心肌进行的是完全消化，则可以分离和培养到一些没有肌节的细胞。这i细胞是球形的，容易附着到培养皿中并且增殖。虽然他们不具备自发性收缩的能力，但是它们具有正常的心肌细胞在体外的许多特点。

PromoCell HCM提供的就是这些球形细胞。这种细胞经证实具有类似祖细胞的分化能力。但是，到现在为止，还没有操作方案可以诱导我们的HCM的 收 缩活动。

应用领域：心脏研究，药理研究

培养中的人类心肌细胞HCM的形态

在体外培,根据细胞培养密度的不同，HCM表现出两种不同的显著形态特征。当细胞以较低密度培养时,HCM会长得比较肥，细胞延展性差，显得比较短（如图1a）。当细胞密度逐渐增加时，心肌细胞则呈现第二种形态。心肌细胞开始 细，拉长并开始在彼此上层生长而形成团块（如图1b）。在这些团块之间，稍肥大的细胞平行排列。

适用于HCM的体外生是培养墓

PromoCell为HCM的生长和增殖开发了一种专门的培,基。

PromoCell的心肌细胞生长培,基所含血清浓度很低（5%V /V），并添加有优选的激素和生长因子。

培养墓的质量控制

PromoCell每一批次的人类心肌细胞都进行严格的质量控制检验。HCM的检测参数包括细胞形态，贴壁率和 细胞活性。此外，使用流式细胞仪分析心肌细胞特异的标记物。另外，在各个倍增数阶段都进行生长性能测 试，一直进行检测到15个倍增数以上。

PromoCell HCM的指控指标

活性

■检测活细胞的比率

■保证每一 支冻存管中的活细胞数>500,000

生长性能测试

■测定对数生长期的倍增时间

■检验各支细胞能培养到15个倍增数以上

表型特征

■通过流式细胞仪检测细胞类型特异性的标记物

HCM的体外培养过程

PromoCell为HCM的生长和增殖开发了一种专门的培,基。 PromoCell的心肌细胞生长培,基所含血清浓3很低（5%V/V），并添加有优选的激素和生长因子。

在PromoCell的HCM的长期体外培养过程中，分化阶段的各个不同标记物的表达情况会有变化。随着HCM培养时间的进一步延长，则稍晚期分化阶段的一i标记物的表达呈阳性，并且有20%以上的HCM对最终分化阶 段的标记物呈现阳性。

当生长到一定密度时，PromoCell的HCM开始分化，并在一段时间以后达到最终的分化状态。分化过程可以通过长期培养后的形态学改 以及各阶段特异性的标记物的出现而得到证实。

PromoCell的HCM的形态随着时间而改变。肌管状的结构是分化状态的心肌细胞的典型标记物，可以在培养的一开始就被检测到。之后，随着细胞密度逐渐增大，肌管开始形成分支状结构。这些分 支状的结构是最终分 化状态的心肌细胞的典型形态特征。

结果中的结论可以由对PromoCell培养,过程h45-间点的分化标记物的分析来证%。当观察到肌管样构时，就会检测c后期分化阶段的标记物。随着培养时间的延长，呈现出后期分化状态的HCM数量增加，并且开始有20%以上的HCM表达最终分化状态的一些特异性标记物。在这些时间点，PromoCell的HCM开始形成分支状结构。

体外培养的PromoCell的HCM特点:

■增殖h的HCM处于较早期的分化阶段。

■HCM可以达到15个倍增数以上，具有极强的增殖能力。

■当HCM生长到一定密度时，分化过程开始。

■HCM能形成肌管状结构和分支状结构。

■在培养中，HCM可以达到最终的分化状态。