伯乐Droplet dPCR俗称为微滴式数字PCR，即或者简称为ddPCR，即 Droplet DigitalPCR

Bio-Rad dPCR技术方法

Droplet dPCR俗称为微滴式数字PCR，即或者简称为ddPCR，即 Droplet DigitalPCR。（Bio-RadTechnologies公司产品）

Bio-Rad于2011年10月正式上市了QX100微滴式数字PCR系统，至今在稀有突变序列(RareMutation and Sequence Detection)检测、病原微生物(Virus and Pathogen Detection)检测和拷贝数变异(CopyNumber Variation)遗传分析、转基因食品检测等方面有了诸多应用实例与文献，显示了“第三代PCR”技术广泛的应用范围与强大的生命力。

此后Bio-Rad于2013年8月14日在QX100微滴式数字PCR的基础上向全球正式推出第二代的微滴式数字PCR系统——QX200微滴式数字PCR系统（QX200Droplet Digital PCR System）。该系统除秉承QX100的特点之外，新加入对EvaGreen染料法的支持，使之可以更好地与定量PCR方法兼容，有效降低实验成本，ddPCR 可对 DNA或 RNA 分子采用绝对定量的方式进行分析，具有无可比拟的精确性，不再需要标准曲线。

目前而言liquid biopsy主要的形式还是血液，对于血液内存在的抑制剂，数字PCR的耐受性如何？美国FredHutchinson癌症研究中心发表的2篇文章很好地回答了上面的疑问，夯实了ddPCR用于ctDNA检测的方法学基础，这两篇文章的重要性在日后会逐渐显现出来。（Toleranceof Droplet-Digital PCR vs Real-Time Quantitative PCR to Inhibitory Substances(Clinical Chemistry 59:11 (2013))）。

这项实验系统比较了微滴式数字PCR和传统定量PCR对SDS、EDTA、Heparin（肝素，血液抗凝剂）等常见PCR抑制物的耐受程度。通过计算和比较两种平台的抑制曲线和zui大抑制浓度中值（IC50）表明，微滴式数字PCR对SDS、肝素的耐受度高于定量PCR（Absolute Quantification by droplet digital PCR versus Analogreal-time PCR (Nature Method, 2013)）。

Bio-Rad为了更好地简化微滴式数字PCR的操作流程，实现walk-away的概念，在QX200微滴式数字PCR系统的基础上特推出对应的全自动型号(QX200Auto DG Droplet Digital PCR System)，该全自动型号的面市大大简化微滴生成的步骤，在45分钟内即可全自动完成96个样品的微滴生成，通过大触摸屏进行程序设置与仪器控制；在微滴生成的过程中，消除不同操作者的人为操作误差，确保微滴发生的一致性，标配HEPA过滤网等,尤其可满足高通量实验室的要求。

QX200 Droplet Digital PCR 系统由两个仪器（QX200 微滴生成和 QX200 微滴分析仪）及其相关的消耗品构成。

QX200 液滴生成仪用于将 PCR 反应生成 20,000 个纳升大小的液滴。在使用热循环仪进行 PCR 后，QX200 微滴分析仪将逐个分析每个样品中的液滴。微滴被吸入后，管路将分解乳化的液滴，并使它们依次通过一个双色光学检测系统。每次运行zui多可处理 96 个样品。系统将计算阳性和阴性微滴的数量，从而以数字格式对靶 DNA 进行绝对定量分析。此外，对于经过 PCR 的液滴，还可以提取扩增的产品以用于下游环节，例如测序或克隆。