细胞凋亡是以细胞内明显的形态和生化变化为特征的程序性细胞死亡过程。是多细胞生物确保严重受损或突变细胞被清除的一个基本过程。这对调节免疫反应、发育和癌症中可能受损至关重要。我们有易于使用的凋亡试剂盒、膜联蛋白V试剂和针对常见凋亡标记物的抗体来确定细胞凋亡水平。

细胞凋亡实验检测原理及常用检测产品介绍

Annexin V

原理：在细胞凋亡的早期阶段，质膜被重新排列，导致细胞膜磷脂不对称性的改变。这些重排的作用之一是在外质膜上显示磷脂酰丝氨酸（PS）。在健康、静止的细胞中，PS仅位于内膜上，因此PS暴露是早期凋亡的迹象。膜联蛋白V在Ca2+存在下对PS具有高结合亲和力，因此是检测凋亡细胞的常用工具。

丝氨酸蛋白酶激活在细胞凋亡、肿瘤恶性程度以及乳腺癌、头颈癌的诊断指标中起着重要作用。

我们的荧光标记丝氨酸蛋白酶抑制剂（FLISP）试剂盒允许检测活细胞中丝氨酸蛋白酶的细胞内糜蛋白酶样活性。细胞内的活性糜蛋白酶样酶与荧光团（FAM）标记的FLISP抑制剂探针共价结合，在细胞内保留绿色荧光信号。细胞内活性糜蛋白酶样酶的浓度越高，观察到的荧光水平越高。FLISP试剂盒还包含碘化丙啶，用于流式细胞术鉴定死亡细胞，以及Hoechst 33342用于荧光显微镜下的核标记。

细胞凋亡实验检测原理及常用检测产品介绍

Active chymotrypsin-like serine protease activity staining by flow cytometry. Jurkat cells were treated as shown with 1mM staurosporine to induce apoptosis. The cells were then stained using the FLISP FAM-Phe-DAP Serine Protease Assay Kit including propidium iodide (APO009). Apoptotic cells positive for serine protease activity can be seen in the bottom right quadrant and dead cells positive for both serine protease and PI in the top right quadrant. Healthy cells are negative for both stains. Data acquired on the ZE5™ Cell Analyzer.

Cathepsin Kits

该试剂盒能够检测溶酶体中包含的活性组织蛋白酶，它们参与自噬途径和吞噬作用。当释放到细胞质中时，它们可以调节细胞凋亡的内源性和外源性途径。组织蛋白酶家族由几种储存在称为溶酶体的细胞器中的蛋白水解酶组成。

这也是涉及溶酶体的细胞自噬的关键途径，这是细胞自我消化的过程。

细胞凋亡实验检测原理及常用检测产品介绍

Fig. 5. Cathepsin B staining in HeLa cells. HeLa cells were stained with Magic Red Cathepsin B Kit (ICT937) using Hoechst as a counterstain. A, Hoechst. B, Magic Red Cathepsin B. C, overlay.

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